Subaru Hasegawa tem a ambição de se tornar uma das melhores estrelas do basquete de todos os tempos. No entanto, isso chega a um aparente impasse quando o time de basquete de sua escola interrompe as atividades por um ano. Chocado com a notícia, ele decide não se envolver mais no basquete. Um dia, sua tia Mihoshi Takamura o convida para treinar o time de basquete feminino da Keishin Academy sobre como jogar o esporte, e ele relutantemente concorda. Ele conhece os alunos da sexta série Tomoka Minato, Maho Misawa, Airi Kashii, Hinata Hakamada e Saki Nagatsuki, e começa a treiná-los no esporte com um objetivo: derrotar todos os adversários fortes ao longo do caminho. Ro-Kyu-Bu! segue o esforço de cinco meninas do ensino fundamental e seu treinador em seu estilo fofo de jogar basquete.